質問し合うと、お互いの理解が進むが、虚勢の人は、質問を受けると無知があからさまになる側面がある。

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最後の難題が中段の画像です。白矢印の先に指定されているFI-SCは JAK-inhibitorの添加前後でどちらも緑色蛍光していません。c,dの実験で使われたFI-SCは前後で蛍光しているからES細胞ではないのだと証明されている。その同じFI-SCを使っているのなら、前後で緑色蛍光していなければならないが、実際の画像は私の50インチ大画面モニターで、しかも最大限に拡大しても、左右[下線]"どちらも"緑色蛍光していない[/下線]のです。ということはこの細胞はFI-SCでないのみならず、ES細胞ですらないのです。
ではなんであるのか。二つの可能性がある。

①私はまだネイチャー誌が二報論文を無料公開していた時に、論文を自分のパソコンに取り込みましたが、今有料になってからは元の公開論文を再確認していません。この時にコピーでデータを取り込んだので、その時の変換で見えなくなってしまったのかもしれない。また、そもそもの小保方さんのデータには緑色蛍光があったのが、論文画像段階では既に見えなくなっていたのかも知れない。これはですから、私には分かりません。

②もう一つの可能性はこの矢印の先にある細胞集団がフィーダー細胞ではないかと推測されることです。小保方さんが間違えて青太矢印以外はFI-SCだと早とちりして大きめの細胞塊に安易に白矢印を付けたのではないかという疑義です。丹羽さんのプロトコルにはFI-SC培地はon feederだと書かれている。
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FI stem cell conversion culture

1. STAP cell clusters were transferred to Fgf4-containing trophoblast stem-cell medium (Tanaka et al, Science, 1998) on MEF feeder cells in 96-well plates (Obokata, Nature, 2014b).

FI幹細胞変換培養

1. STAP細胞クラスターがFGF4を含む96ウェルプレート中のMEFフィーダー細胞上のＴＳ細胞＜栄養芽層幹細胞＞培地 (Tanaka et al, Science, 1998)に移される (Obokata, Nature, 2014b)。

通常ES細胞の培養に使うフィーダー細胞にはガンマ線照射で増殖しないように処理されたマウスの線維芽細胞が使われている。このTS培地でもMEF、即ちマウス胎児線維芽細胞 (Mouse Embryonic Fibroblast)が使われているわけです。小保方さんが間違えて解凍したままの培養細胞でこの実験を行うとフィーダー細胞の入ったままの実験になる。

ただし、このExtended Data Figure 5-a～fのレジェンドは以下で、under feeder-free conditionsというのはトリプシン処理でフィーダー細胞を取り除いた状態ということです。
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a–f, JAK inhibitor treatment assay for Fgf4-induced stem cells. Fgf4-induced stem cells were cultured under feeder-free conditions and treated with 0.6 μM JAK inhibitor for 48 h. JAK inhibitor treatment assay eliminated ES cells (Oct4-GFP+) from the culture (a, b). The level of Oct4-GFP expression in Fgf4-induced stem cells, which was moderate, was maintained even after JAK inhibitor treatment (c, d; three independent experiments). Scale bar, 100 μm.e, f, For an additional control, Fgf4-induced stem cells were plated in trophoblast stem-cell medium containing Fgf4 together with Oct4-GFP ES cells that constitutively expressed BFP (the number of plated cells was one-tenth of that of plated Fgf4-induced stem cells). Whereas BFP-expressing colonies (ES-cell-derived) still expressed Oct4-GFP in trophoblast stem-cell culture medium after 2 days (e), no Oct4-GFP+ colonies from BFP-expressing ES cells were observed in the JAK-inhibitor-treated culture (f).

a-f,Fgf4誘導幹細胞に関するJAK阻害剤処理実験。 Fgf4誘導幹細胞をフィーダー細胞無しで培養し、0.6μMのJAK阻害剤で48時間処理した。 JAK阻害剤処理実験は、ES細胞（Oct4-GFP 陽性）を培地から除去した（a、b）。 Fgf4誘導幹細胞におけるOct4-GFP発現のレベルは、中等度ではあるが、JAK阻害剤処理後でも維持された（c、d; 3回の独立した実験）。 スケールバー、100μm。e,f, 加えて別のコントロール実験として、Fgf4誘導性幹細胞を、Oct4-GFPとともにBFPを恒常的に発現する ES細胞（播種細胞数はFgf4誘導幹細胞数の数の1/10）と共にFgf4を含有する栄養膜幹細胞培地に播種した。BFPを発現するコロニー（ES細胞由来）が2日後に栄養膜幹細胞培養培地中でOct4-GFPを依然として発現した（e）のに対して、BFP発現ES細胞由来のOct4-GFP 陽性コロニーはJAK阻害剤添加培地では観察されなかった(f）。

問題はこのunder feeder-free conditionsという言葉が以下の文章のどこまで掛かっているのかということです。

①a–f, JAK inhibitor treatment assay for Fgf4-induced stem cells. 
②Fgf4-induced stem cells were cultured [下線]under feeder-free conditions[/下線] and treated with 0.6 μM JAK inhibitor for 48 h.
③ JAK inhibitor treatment assay eliminated ES cells (Oct4-GFP+) from the culture (a, b). 
④The level of Oct4-GFP expression in Fgf4-induced stem cells, which was moderate, was maintained even after JAK inhibitor treatment (c, d; three independent experiments). Scale bar, 100 μm.
⑤e, f, For an additional control, Fgf4-induced stem cells were plated in trophoblast stem-cell medium containing Fgf4 together with Oct4-GFP ES cells that constitutively expressed BFP (the number of plated cells was one-tenth of that of plated Fgf4-induced stem cells). 
⑥Whereas BFP-expressing colonies (ES-cell-derived) still expressed Oct4-GFP in trophoblast stem-cell culture medium after 2 days (e), no Oct4-GFP+ colonies from BFP-expressing ES cells were observed in the JAK-inhibitor-treated culture (f).

どうでしょうか。

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